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        1. 當前位置:首頁(yè) > 科研合作 > 數字PCR系列

          Research Cooperation

          科研合作

          人ctHPV 16/18定量檢測(數字PCR法)

          根據國家癌癥中心數據,我國宮頸癌年新發(fā)15萬(wàn)例,死亡5.5萬(wàn)例,發(fā)病例數和死亡例數都超過(guò)了其他婦科腫瘤的總和[1]。絕大多數宮頸癌由高危HPV(hrHPV)持續感染所致,病毒的E6和E7基因可能與宿主DNA發(fā)生整合。hrHPV通常包括14種型別,其中16、18型的合計占比超過(guò)70% [2]。除宮頸癌以外,頭頸部鱗癌、肛門(mén)癌、陰道癌、外陰癌等癌種均有一定比例是由HPV感染所致。


          循環(huán)腫瘤DNA(ctDNA)是腫瘤組織、細胞等釋放到循環(huán)系統中的腫瘤基因組片段,整合到宿主基因組中的HPV也以ctDNA的形式釋放[3]。已有多部指南共識推薦ctDNA用于分子殘留病灶(MRD)評估,ctHPV在總游離DNA中不受野生型背景的干擾,比點(diǎn)突變更容易檢測和鑒別。




          已有多項研究將ctHPV用于宮頸癌、口咽癌的預后和監測,研究發(fā)現達到治療終點(diǎn)時(shí)和/或監測過(guò)程中ctHPV陽(yáng)性的患者生存數據更差,而且ctHPV較常規方法可提前發(fā)現復發(fā)[4-5]。其他一些研究提示基于數字PCR(ddPCR)法的ctHPV檢測靈敏度優(yōu)于熒光定量PCR(qPCR)法[6]。ddPCR法的檢測性能與基于高通量測序的HPV-seq相近[7],且檢測方法簡(jiǎn)便,成本更低。

          ctHPV在宮頸癌監測中的性能[4]

          左圖:治療后ctHPV陽(yáng)性與更短的PFS相關(guān)(p<0.0001);

          右圖:ctHPV監測到可能復發(fā)的時(shí)間較臨床確診復發(fā)的時(shí)間平均提前10個(gè)月(2~15個(gè)月)。


          [1] https://doi.org/10.1016/j.jncc.2024.01.006

          [2] 人乳頭狀瘤病毒核酸檢測用于宮頸癌篩查中國專(zhuān)家共識(2022)

          [3] Int J Cancer. 2023 Jun 1;152(11):2232-2242.

          [4] Clin Cancer Res. 2021 Nov 1;27(21):5869-5877.

          [5] J Clin Oncol. 2020 Apr 1;38(10):1050-1058.

          [6] J Pathol Clin Res. 2016 Jun 28;2(4):201-209.

          [7] J Clin Oncol. 2023 Nov 16:JCO2300954.

          [8] ESMO Open. 2021 Jun;6(3):100154.

          檢測項目

          項目名稱(chēng)

          適配機型

          項目規格

          樣本類(lèi)型

          送檢報告周期

          人ctHPV 16定量檢測

          Bio-Rad:QX200等

          48測試/盒

          外周血

          (游離DNA保存管保存)

          3個(gè)工作日

          人ctHPV 18定量檢測


          注:僅供科研參考使用,16/18型復合感染患者需同時(shí)進(jìn)行兩項檢測。

          檢測意義

          適用于因HPV 16型/18型感染導致的宮頸癌、頭頸部鱗癌等癌種患者:

          (1)輔助預測治療效果:多個(gè)研究證實(shí),達到治療終點(diǎn)時(shí)和/或監測過(guò)程中出現ctHPV陽(yáng)性的患者無(wú)進(jìn)展生存(PFS)、無(wú)疾病生存(DFS)、總生存(OS)等數據更差[4-5][8]

          (2)達到治療終點(diǎn)后的復發(fā)監測:ctHPV較常規方法可提前提示復發(fā),宮頸癌患者檢測到可能復發(fā)的時(shí)間較臨床確診復發(fā)的時(shí)間平均提前10個(gè)月,口咽癌患者平均提前6.6個(gè)月[4-5]


          監測方案(僅供參考)


          治療前

          治療期間監測

          確診后、治療前的任意時(shí)間

          (活檢后最好間隔7天)

          采集基線(xiàn)數據

          達到治療終點(diǎn)時(shí)

          (最后一次治療結束后的7~14天)

          再次進(jìn)行檢測

          治療后1~3年內,每三個(gè)月監測一次

          治療后4~5年內,每六個(gè)月監測一次

          治療6年后,每年監測一次


          優(yōu)勢特點(diǎn)

          技術(shù)領(lǐng)先:ctHPV用于MRD檢測,可以輔助預測治療效果,更可以提早數月提示疾病復發(fā);

          靈敏度高:采用ddPCR的方法,檢測限低至每反應1~3個(gè)拷貝,靈敏度優(yōu)于qPCR法;

          特異性強:檢測整合后的人類(lèi)ctHPV,不與正常人類(lèi)基因組和其他12個(gè)hrHPV型別出現交叉干擾;

          檢測快速:實(shí)驗操作簡(jiǎn)便,報告周期和檢測成本均優(yōu)于HPV-seq檢測,普惠可及。


          操作流程

          1.核酸提取

          2.微滴制備

          3.擴增

          4.數據分析

          5.出具報告


          檢測服務(wù)流程

          1.咨詢(xún)相關(guān)事項

          2.進(jìn)行樣本取樣

          3.樣本快遞至飛朔檢測點(diǎn)

          4.上機檢測

          5.出具報告

          6.報告送出

          7.提供專(zhuān)業(yè)咨詢(xún)和疑惑解答

          —— 僅供科研參考使用 ——


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