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          Research Cooperation

          科研合作

          宮頸癌MRD檢測(cè)(ctHPV 16/18)(數(shù)字PCR法)

          根據(jù)國(guó)家癌癥中心數(shù)據(jù),我國(guó)宮頸癌年新發(fā)15萬(wàn)例,死亡5.5萬(wàn)例,發(fā)病例數(shù)和死亡例數(shù)都超過(guò)了其他婦科腫瘤的總和[1]。絕大多數(shù)宮頸癌由高危HPV(hrHPV)持續(xù)感染所致,病毒的E6和E7基因可能與宿主DNA發(fā)生整合。hrHPV通常包括14種型別,其中16、18型的合計(jì)占比超過(guò)70% [2]。除宮頸癌以外,頭頸部鱗癌、肛門癌、陰道癌、外陰癌等癌種均有一定比例是由HPV感染所致。


          循環(huán)腫瘤DNA(ctDNA)是腫瘤組織、細(xì)胞等釋放到循環(huán)系統(tǒng)中的腫瘤基因組片段,整合到宿主基因組中的HPV也以ctDNA的形式釋放[3]。已有多部指南共識(shí)推薦ctDNA用于分子殘留病灶(MRD)評(píng)估,ctHPV在總游離DNA中不受野生型背景的干擾,比點(diǎn)突變更容易檢測(cè)和鑒別。


          宮頸癌MRD檢測(cè)概覽[3]



          已有多項(xiàng)研究將MRD檢測(cè)用于宮頸癌、口咽癌的預(yù)后和監(jiān)測(cè),研究發(fā)現(xiàn)達(dá)到治療終點(diǎn)時(shí)和/或監(jiān)測(cè)過(guò)程中MRD陽(yáng)性的患者生存數(shù)據(jù)更差,而且MRD較常規(guī)方法可提前發(fā)現(xiàn)復(fù)發(fā)[4-5]。其他一些研究提示基于數(shù)字PCR(ddPCR)法的MRD檢測(cè)靈敏度優(yōu)于熒光定量PCR(qPCR)法[6]。ddPCR法的檢測(cè)性能與高通量測(cè)序(NGS)相近[7],且檢測(cè)方法簡(jiǎn)便,成本更低。

          MRD在宮頸癌監(jiān)測(cè)中的性能[4]

          左圖:治療后MRD陽(yáng)性與更短的PFS相關(guān)(p<0.0001);

          右圖:MRD陽(yáng)性較臨床確診復(fù)發(fā)的中位提前時(shí)間為10個(gè)月(2~15個(gè)月)。


          [1] Zhonghua Zhong Liu Za Zhi. 2024 Mar 23;46(3):221-231.

          [2] 人乳頭狀瘤病毒核酸檢測(cè)用于宮頸癌篩查中國(guó)專家共識(shí)(2022)

          [3] Int J Cancer. 2023 Jun 1;152(11):2232-2242.

          [4] Clin Cancer Res. 2021 Nov 1;27(21):5869-5877.

          [5] J Clin Oncol. 2020 Apr 1;38(10):1050-1058.

          [6] J Pathol Clin Res. 2016 Jun 28;2(4):201-209.

          [7] J Clin Oncol. 2023 Nov 16:JCO2300954.

          [8] ESMO Open. 2021 Jun;6(3):100154.

          檢測(cè)項(xiàng)目

          采用數(shù)字PCR的方法,檢測(cè)已整合到人類基因組,并通過(guò)腫瘤釋放到外周血中的,游離DNA形態(tài)的HPV 16型/18型E6 E7基因。進(jìn)行本檢測(cè)前需明確HPV分型結(jié)果為16型/18型。

          項(xiàng)目名稱

          適配機(jī)型

          項(xiàng)目規(guī)格

          樣本類型

          送檢報(bào)告周期

          宮頸癌MRD檢測(cè)

          (ctHPV 16)試劑盒

          Bio-Rad:QX200等

          48測(cè)試/盒

          血漿cfDNA

          3個(gè)工作日

          宮頸癌MRD檢測(cè)

          (ctHPV 18)試劑盒


          注:僅供科研參考使用,16/18型復(fù)合感染患者需同時(shí)進(jìn)行兩項(xiàng)檢測(cè)。

          檢測(cè)意義

          適用于因HPV 16型/18型感染導(dǎo)致的宮頸癌、頭頸部鱗癌等癌種患者:

          (1)輔助預(yù)測(cè)治療效果:多個(gè)研究證實(shí),達(dá)到治療終點(diǎn)時(shí)和/或監(jiān)測(cè)過(guò)程中出現(xiàn)MRD陽(yáng)性的患者無(wú)進(jìn)展生存(PFS)、無(wú)疾病生存(DFS)、總生存(OS)等數(shù)據(jù)更差[4-5][8]

          (2)達(dá)到治療終點(diǎn)后的復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè):MRD較常規(guī)方法可提前提示復(fù)發(fā),宮頸癌患者檢測(cè)到可能復(fù)發(fā)的時(shí)間較臨床確診復(fù)發(fā)的中位提前時(shí)間為10個(gè)月,口咽癌患者為6.6個(gè)月[4-5]


          監(jiān)測(cè)方案(僅供參考)


          治療前

          治療期間監(jiān)測(cè)

          確診后、治療前的任意時(shí)間

          (活檢后最好間隔7天)

          采集基線數(shù)據(jù)

          達(dá)到治療終點(diǎn)時(shí)

          (最后一次治療結(jié)束后的7~14天)

          再次進(jìn)行檢測(cè)

          治療后1~3年內(nèi),每三個(gè)月監(jiān)測(cè)一次

          治療后4~5年內(nèi),每六個(gè)月監(jiān)測(cè)一次

          治療6年后,每年監(jiān)測(cè)一次


          優(yōu)勢(shì)特點(diǎn)

          技術(shù)領(lǐng)先:MRD檢測(cè)可以輔助預(yù)測(cè)治療效果,與傳統(tǒng)方法相比,更可以提早數(shù)月提示疾病復(fù)發(fā);

          靈敏度高:采用ddPCR的方法,檢測(cè)限低至每反應(yīng)1~3個(gè)拷貝,靈敏度優(yōu)于qPCR法;

          特異性強(qiáng):檢測(cè)整合后的腫瘤ctHPV,不與正常人類基因組和其他12個(gè)hrHPV型別出現(xiàn)交叉干擾;

          檢測(cè)快速:實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)便,報(bào)告周期和檢測(cè)成本均優(yōu)于NGS檢測(cè),普惠可及。


          操作流程

          1.核酸提取

          2.微滴制備

          3.擴(kuò)增

          4.數(shù)據(jù)分析

          5.出具報(bào)告


          檢測(cè)服務(wù)流程

          1.咨詢相關(guān)事項(xiàng)

          2.進(jìn)行樣本取樣

          3.樣本快遞至飛朔檢測(cè)點(diǎn)

          4.上機(jī)檢測(cè)

          5.出具報(bào)告

          6.報(bào)告送出

          7.提供專業(yè)咨詢和疑惑解答

          —— 僅供科研參考使用 ——


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